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　　蛇足石杉HUPERZIASERRATATHUNBTREV，系石杉科HUPERIACEAE石杉属HUPERZIA多年生蕨类植物，民间常用于治疗痈疖、跌打损伤、肿毒等症。蛇足石杉内含石杉碱甲，为可逆性胆碱酯酶抑制剂，对于预防和治疗老年性痴呆、记忆力减退和重症肌无力具有显著的疗效。目前国际上已将石杉碱甲列为第二代乙酰胆碱酯酶抑制剂之一，是治疗老年性痴呆AD的特效药。本研究以野生蛇足石杉为材料，初步建立蛇足石杉离体培养再生体系，为以后的离体快繁研究提供指导同时从外植体中分离出了3种内生真菌，测定其ITS序列进行分子鉴定定性检测了3种内生真菌是否产石杉碱甲，并对其抗植物病原真菌活性进行了检测，为进一步研究提供参考。主要研究结果如下1蛇足石杉离体培养研究1获取无菌外植体的最佳灭菌条件。外植体洗净后在001MOLL1HCL5％NACLO00024MOLL1柠檬酸配成的溶液中浸泡1MIN，再依次浸入70％乙醇中1MIN，5％NACLO中15MIN，7％H2O2中10MIN可得到最佳表面灭菌效果，40％的外植体没有微生物污染迹象再经05MGL1孔雀石绿50，100MGL1AAS联合使用时，可获得最佳的内生菌灭菌效果，20％的外植体无感染。2外植体继代培养后可产生不定芽。无菌外植体培养约90D后，开始出现生长变化，主要有两种变化类型一种为外植体本身没有出现明显的生长，但靠近茎基部的同一节点处开始分化出新芽另一种变化为外植体有少量的生长，且在茎的上部形成多个小不定芽，不定芽能剥离母株独立生长，5MM以上的不定芽接种到1/2MS30GL1蔗糖的培养基上，存活率可达90％，120D后生长为23CM的幼苗。3无菌苗诱导产生不定根。对无菌苗主枝的顶芽以及主枝上产生的不定芽进行了生根诱导，在基本培养基中添加IBA10MGL120MGL1谷氨酰胺，对两种类型的无菌苗的生根有明显的促进作用，其中在1/3MS基本培养基上添加的效果最好，不定芽的生根率可达90％，顶芽的生根率也可达30％。2内生线种内生真菌，测定ITS序列对其进行鉴定。3种内生真菌，分别命名为NSZJⅠ，NSZJⅡ，NSZJⅢ，经鉴定NSZJⅠ属座囊菌纲DOTHIDEOMYCETIDAE，煤炱目CAPNODIALES，小球壳科MYCOSPHAERELLACEAE,PSEUDOCERCOSPORELLA属。NSZJⅡ在GENEBANK中BLAST结果相似序列较少，初步鉴定属于座囊菌纲DOTHIDEOMYCETIDAE，煤炱目CAPNODIALES。NSZJⅢ属于座囊菌纲DOTHIDEOMYCETES，座囊菌目DOTHIDEALES,HORTAEA属。23种内生真菌产石杉碱甲的定性检测。经薄层色谱法TLC测定，3种内生线种内生真菌抗植物病原真菌活性检测。取油茶叶枯病原真菌（小孢拟盘多毛孢菌PESTALOTIOPSISMICROSPORA）、油茶炭疽病原真菌胶孢炭疽菌CALLETOTRICHUMGLOEOSPORIOIDES、油茶软腐病原真菌伞座孢菌AGARICODOCHIUMCAMELLIA、核桃腐烂病原真菌壳囊孢菌CYTOSPORAJUGLANDIS四种植物病原真菌为实验菌，经测定，NSZJⅠ对四种植物病原真菌抗菌活性较弱NSZJⅡ对油茶叶枯病原真菌有较好的抗菌活性，抑制率达100％NSZJⅢ对油茶叶枯及炭疽病原真菌有较好的抗菌活性，抑制率达100％。

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